美国伊人网-性感美女一区-成人av小说-800av免费在线观看-野花社区在线www日本-综合精品在线-精品无码无人网站免费视频-亚一区二区三区-国产av无码专区影视-亚洲综合憿情五月丁香五月网

生物膜離子通道是各種無機離子跨膜運動被動運輸的通路。生物膜上無機離子出入細胞的方式有被動運輸（順離子濃度）與主動運輸（逆離子濃度）。其中被動運輸的通路被稱為離子通道。Ca2+通道廣泛存在于各種生物組織的細胞膜中。藥物對Ca2+通道的作用可分為：①通道阻斷或抑制劑，可分為苯烷基胺類（如異博定、甲基異博定D600）、苯硫氮?類、雙氫吡啶類等類型。②通道激活劑，一些雙氫吡啶化合物如BayK8644等藥物可活化Ca2+通道。鈣離子通道定義：它是一種跨越細胞膜的結構，它嚴格控制著鈣離子進入細胞的過程。由于鈣離子信號與很多重要生理功能相關，例如心臟收縮、基因轉錄等，因此調節鈣離子進入細胞的反饋機制就關重要。

酶標儀用于檢測鈣離子通路主要通過兩種方式：1，熒光法。化合物與細胞膜上離子通道結合后，改變離子通道狀態，通道打開，鈣離子進入細胞。進入細胞后與細胞內鈣離子熒光指示劑結合，發出熒光后酶標儀捕獲，熒光強度與進入細胞的鈣離子含量成正比。熒光指示劑多用FLuo3，Fluo3-AM是一種可以乙酰甲酯衍生物，可以穿透細胞膜進入細胞，進入細胞后被細胞內的酯酶剪切成FLuo3并滯留在細胞內，鈣離子進入細胞后與之結合，會發出較強的熒光。

2，發光法。水母發光蛋白復合物（Aequorin）由22kDa的水母蛋白（Apoaequorin protein）、分子氧和底物腔腸素組成。只有當鈣離子（Ca2+）與該復合物結合后，腔腸素才能被氧化生成高能量產物Coelenteramide，同時釋放出CO2和藍色熒光（——466 nm）。正是此Ca2+依賴性的反應過程（見圖1），使得腔腸素非常適用于監測活細胞內鈣離子水平。與常規的熒光鈣離子指示劑相比，其主要具有以下幾個優點，1）能檢測較大范圍的鈣濃度 – 從0.1 μM >100μM；2）樣品無自體熒光，背景熒光低于使用熒光鈣離子指示劑；雖然信號比使用熒光鈣離子指示劑弱，但是通過成像儀器可以得到更高的信噪比，因此具有更高的靈敏度。3）水母發光蛋白復合體能夠穩定維持在細胞內，使其能夠進行數小時數天的鈣離子監測。